Investigaciones

Objetivo: Describir los resultados obtenidos en ciclos de fertilización in-vitro por ICSI luego de inyectar espermatozoides seleccionados por previa unión a zona pelúcida. Diseño: Estudio descriptivo. Pacientes: Se incluyó en el estudio a parejas que realizaron ciclos de fertilización in-vitro por ICSI, en casos con factor masculino severo, o fragmentación nuclear elevada. Métodos: Se utilizaron ovocitos no fertilizables homólogos o heterólogos, que fueron colocados de 4 a 8 por paciente en placas con medio de fertilización in vitro previamente equilibrado a 37o C y 5% CO2. Esos ovocitos se co incubaron durante 3 a 6 horas con una preparación de espermatozoides de la pareja a tratar. Luego se aspiraron con una pipeta de un diámetro interno de aproximadamente 0,3 mm y se lavaron suavemente por 5 gotas sucesivas de medio fresco preequilibrado para separar los espermatozoides sueltos. Finalmente se transfirió los ovocitos con los espermatozoides adheridos a una gota de 5 µl en la placa de inyección, y se procedió a aspirarlos y expelerlos repetidas veces con una micro pipeta de diámetro interno muy ajustado al ovocitario, para así separar los espermatozoides unidos. A continuación se realizó ICSI de manera habitual, utilizando los espermatozoides así seleccionados. El tratamiento se completó siguiendo el protocolo estándar. Resultados: La técnica de selección se utilizó en 11 ciclos, la tasa de fertilización fue del 67%, se lograron 5 embarazos, 4 por transferencia en fresco y 1 por transferencia de criopreservados. Quedan criopreservados embriones de cinco ciclos. Todos los embarazos siguen en curso Conclusiones: Es sabido que las poblaciones de espermatozoides unidos a la zona pelúcida muestran mejores características en cuanto a morfología e integridad nuclear que la población general de la misma muestra. La utilización de estos espermatozoides para microinyección podría permitir realizar una selección más fisiológica que la resultante de elegir al azar o por morfología en fresco, o por algunos de los otros métodos de selección posibles. El material usado es accesible, no implica problemas éticos ni costos extra, y en nuestra escasa experiencia dio buenos resultados y la técnica pudo usarse aún en casos en que no hubiera resultado posible utilizar otros métodos debido al escaso número de espermatozoides disponible. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo: Presentar los resultados obtenidos al realizar activación con estroncio en casos de azoospermia secretora tratados con fertilización in-vitro por ICSI. Diseño: Estudio retrospectivo. Pacientes: Se incluyó en el estudio a parejas que realizaron ciclos de fertilización in vitro por ICSI en casos con azoospermia secretora y en los cuales los espermatozoides debieron obtenerse a partir de biopsias de testículo. Métodos: Treinta minutos post ICSI los ovocitos fueron incubados durante una hora en un medio en que el Calcio que fue reemplazado por Estroncio (Sr++), luego los ovocitos inyectados se pasaron a medio de cultivo normal conteniendo Calcio, luego de sucesivos lavados para eliminar restos de Sr++. Se completó el cultivo, y resto del tratamiento de la manera estándar. Resultados: En total se trataron con Sr++ 21 ciclos con biopsia de testículo, en todos los casos se obtuvieron embriones, en 20 ciclos se realizó transferencia en fresco, en el restante se criopreservaron todos los embriones siendo transferidos en un ciclo posterior. Se observaron 10 embarazos en los ciclos con transferencia en fresco, y uno más en el ciclo con embriones criopreservados. De estos 6 llegaron a término (4 simples y 2 dobles) y otro doble se encuentra en curso. Se produjeron 3 pérdidas espontáneas y una interrupción voluntaria por aneuploidia del feto. Otros 55 ciclos de ICSI con biopsia de testículo que no fueron tratados con Sr++ sirvieron como grupo control. En los 55 del grupo control se obtuvieron 13 embarazos. De estos, 8 llegaron a término, se produjeron 4 pérdidas y en un caso se perdió contacto con el paciente. Las edades no diferían entre ambos grupos (control: 32,8± 4,9 años, tratado: 31,87 ± 5 años P=0,442), tampoco el número de ovocitos maduros (control: 12,77 ± 6 , tratado 11,36 ± 4,8 , P=0,283) ni la tasa de fertilización (control 52,5%, tratado 48,4%, P=0,294). La tasa de embarazos mostró diferencia significativa entre grupos (control = 23,6 % , tratado = 52 % (P=0,023)). Conclusiones: El tratamiento de activación con Sr++ en los ciclos de ICSI con biopsia de testículo mostró una mejor en la tasa de embarazo. Esto no se debe a un efecto en la tasa de fertilización, pues a diferencia con lo descripto para espermatozoides eyaculados, no se observaron mejoras en este parámetro. Si bien el poder estadístico de un estudio como el aquí presentado limita su validez, los resultados obtenidos son promisorios y sugieren la conveniencia de ampliarlo. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo: Describir resultado de tratamientos de fertilización asistida de alta complejidad en pacientes con pronóstico desfavorable. Pacientes: Se incluyeron ciclos de FIV/ICSI en pacientes tratados en los años 2004 a 2007 inclusive, que tuvieron de 1 a 3 oocitos Metafase 2 . Métodos: Se analizó nuestra base de datos para determinar resultados de ciclos con las características mencionadas. Resultados: Un total de 1180 ciclos respondía a lo buscado. De estos, el 25,5 % (n=301) tenía menos de 35 años, 21,7 % (n=256) de 35 a 37 años, 27,5% (n=325) de 38 a 40 años, y el resto 25,3% (n=298) más de 40 años. En 479 ciclos se obtuvo un oocito metafase 2 (M2), en 397 ciclos: 2 oocitos M2, y en 304 ciclos: 3 oocitos M2. En todos casos se inseminó por ICSI, la tasa de fertilización normal fue 61,7 %. De los 1348 oocitos fertilizados, clivó el 96,7% (1304) y 1239 embriones fueron transferidos. La morfología embrionaria fue: excelente-muy buena en 48%, buena- regular: 44% y 8% de mala morfología. En 857 ciclos (72,6 %) se llegó a la transferencia, en el 27,4% no hubo transferencia. Se observaron 116 casos con subunidad  hCG positiva, 96 fueron embarazos clínicos, 13 abortaron y 2 ectópicos. Conclusiones: A pesar de una mala respuesta a la estimulación es posible lograr embarazos utilizando oocitos propios, aún en aquellas pacientes de edad desfavorable. Debe informarse claramente cuales son las reales posibilidades de éxito en estos casos a fin de no crear falsas expectativas. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo: Recuento de células NK endometriales (uNK) totales y angiogénicas en ventana implantatoria de pacientes infértiles vs. donantes fértiles. Materiales y Métodos: Las muestras de endometrio fueron obtenidas en ventana implantatoria por biopsia con Pipelle de Cornier. Fueron incluidas en el estudio un total de 10 pacientes con al menos una falla de FIV y dos años de infertilidad; y 10 donantes fértiles. El recuento de uNK totales y uNK angiogénicas fue determinado por la técnica de citometría de flujo (FACS), mediante el uso de anticuerpos fluorescentes dirigidos contra los marcadores de superficie de cada una de ambas poblaciones. Los resultados fueron analizados estadísticamente por  el t-test. Resultados: Conclusiones: Los datos obtenidos nos permiten postular la potencialidad de esta técnica de recuento de células NK por citometría de flujo, como método de diagnóstico y seguimiento de tratamientos en pacientes infértiles ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo: Estudiar el efecto inmunomodulador de la suplementación dietaria con vitamina E en pacientes infértiles, sobre el recuento de células natural killer angiogénicas endometriales y sobre la producción local de la citoquina reguladora de la vascularización: IL-6 (Interleuquina-6). Grupo de Estudio: Mujeres infertiles Infertilidad 1º, 21- 38 años, BMI ≤ 26, cavidad uterina normal FSH < 10, al menos con 2 ciclos de estimulación: (≥ 5 ovocitos Transferencias de 5 embriones morfológicamente excelentes ó buenos ( (clase A – AB) en 2 ciclos), ciclo menstrual entre 24 y 35 días Toma de muestra: La biopsia de endometrio se realizó con Pipelle de Cornier en ventana implantatoria, bajo consentimiento informado, en pacientes infértiles durante dos ciclos consecutivos de prueba (sin búsqueda de embarazo) Tratamiento: El primero ciclo sin suplementar y el siguiente suplementado con 800U/día de vitamina E. Determinaciones: Los niveles de IL-6 se determinaron por ELISA y la relación de la subpoblación de uNK angiogénica sobre la total, fue determinada por la técnica de citometría de flujo (FACS). Los resultados fueron analizados estadísticamente por t-test. Resultados: La suplementación dietaria con vitamina E incrementó la población de células uNK angiogénicas La suplementación dietaria con vitamina E incrementó los niveles de IL-6 endometriales Conclusión: La suplementación dietaria de pacientes infértiles con 800U diarias de Vitamina E fue capaz de normalizar los niveles deficientes de células NK angiogénicas endometriales. Este efecto fue acompañado de un incremento en los niveles de la citoquina IL-6 reguladora de la vascularización, cuya deficiencia ha sido reportada en pacientes con aborto recurrente de origen inmunológico y hematológico. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo principal Desarrollar las técnicas reproductivas en especies poco estudiadas Importancia de la investigación Aplicación de la fertilidad asistida a la mejora genética de estas especies de importancia para el desarrollo sustentable de las economías regionales. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo principal Recuperación de especies con alto impacto positivo en el medio ambiente, cuya desaparición pone en riesgo el equilibrio del ecosistema al cual pertenecen. Recuperación de especies amenazadas para su conservación y devolución al entorno natural, zoológico o ente privado de acuerdo a lo mejor para el futuro de la especie Importancia de la investigación Aplicación de la fertilidad asistida a la recuperación de especies de importancia ecológica o económica. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo principal Evaluar la expresión de ARN mensajero de potenciales marcadores de calidad ovocitaria en células de granulosa humana, por la técnica de RT PCR. Importancia de la investigación Los resultados de este estudio permitirían la creación de  una herramienta de selección del ovocito más apto para ser fertilizado. ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo principal Crear un registro de datos de perinatales de niños nacidos bajo técnicas de reproducción asistida para poder comparar el impacto de las mismas sobre el desarrollo y la salud perinatal. Importancia de la investigación Este estudio sentaría las bases para el primer registro nacional de bebés nacidos bajo tratamientos de fertilidad asistida ¡QUIERO AYUDAR!

Objetivo principal Investigar la efectividad de las técnicas disponibles para inducir la activación ovocitaria en casos de falla del mecanismo natural. Importancia de la investigación Este estudio permitiría mejorar las posibilidades de lograr el embarazo en parejas con fallas en los mecanismos de activación ovocitaria debido a deficiencias en los espermatozoides para iniciar ese proceso. ¡QUIERO AYUDAR!