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NIVELES DE SUBUNIDAD BETA POST TRATAMIENTOS DE IN VITRO Y SU CORRELACION CON LA EVOLUCION DEL EMBARAZO

Resumen Luego de un tratamiento de in vitro se realiza un test de sub unidad beta cuantitativa en sangre a los 16 días de la captación ovocitaria para verificar si el tratamiento fue exitoso. El resultado no solo sirve para confirmar el embarazo, sino que puede proveer información adicional sobre el pronóstico evolutivo del mismo. Objetivo Comparar la evolución del embarazo luego de un tratamiento de in vitro con óvulos propios a partir del del primer valor de sub unidad beta de gonadotrofina coriónica humana. Diseño Estudio transversal retrospectivo Materiales y Métodos El estudio incluyó los tratamientos de in vitro con óvulos propios realizados durante los años 2015 y 2016. Se excluyeron los embarazos obtenidos por ovodonación o transferencia de embriones criopreservados, así también como los embarazos gemelares. Se tomaron en cuenta valores iniciales de sub beta realizados 16 días post transferencia embrionaria y se correlacionó dicho valor con la evolución del embarazo durante el primer trimestre, los nacidos vivos y su peso al nacimiento. Se utiliza la prueba chi2 para comparar los resultados. Los datos se procesaron con  SPSS versión 16. Resultados Se incluyeron 341casos. La edad promedio de las pacientes fue de 35,9 años (rango 23-46). Se clasificó a las pacientes de acuerdo con los resultados de sub beta en cuartiles: cuartil 1: 11-72, cuartil 2: 78-264, cuartil 3: 266-516, cuartil 4: 535-11000 UI. (Tabla 1) La comparación de los resultado de embarazo por niveles de sub unidad beta muestra que existe relación estadísticamente significativa (Chi2=79,232; p<0,001): embarazo bioquímico es más probable en el cuartil 1 de sub beta y menos probable en los cuartiles 3 y 4 de sub beta. embarazo clínico es más probable en el cuartil 4 y menos probable en el cuartil 1 de sub beta. embarazo ectópico es más probable en el cuartil 1 de sub beta. no se observan diferencias significativas en cuanto a probabilidad de aborto (Tabla 2). La proporción de nacidos vivos no muestra diferencias por niveles de sub beta (Chi2=1,622; p=0,654); hubo dos fetos muertos en pacientes con sub beta del C3 (266-516) y un feto muerto en pacientes con sub beta del C4 (535-11000). No se observa relación estadísticamente significativa entre cuartil de sub beta y peso al nacer (Chi2=2,723; p=0,436). Conclusión: El valor de sub unidad beta puede emplearse como predictor de evolución favorable o adversa durante el primer trimestre de un embarazo post in vitro, ayudando a un mejor monitoreo y asesoramiento de los pacientes ¡QUIERO AYUDAR!

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ESTUDIO DE MATERIAL DE ABORTO. ¿DIFERENTES TÉCNICAS E INTERVENCIONES PARA UN MISMO RESULTADO?

Objetivo Describir los resultados genéticos del material de aborto según la técnica usada. Materiales y Métodos Estudio restrospectivo y observacional, desde 2008 a 01/2019 inclusive. La edad gestacional promedio fue de 8.4 sem (5-12). Las muestras primero se obtuvieron con histeroembrioscopía, luego punción de vellosidades y finalmente aspiración manual endouterina (AMEU). Resultados Conclusión: El estudio genético aporta al diagnóstico del aborto, siendo la genética su principal causa. La citogenética esta siendo reemplazada por las nuevas tecnologías que no precisan  medios de cultivo,  pueden descartar contaminación materna, los resultados  son más rápidos , con mayor precisión y resolución diagnóstica. Se necesitan estudios de costo efectividad para evaluar el aporte del estudio genético de material de aborto y así evitar estudios innecesarios. ¡QUIERO AYUDAR!

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¿ES MENOR LA RESPUESTA OVARICA EN PACIENTES CON CANCER DE MAMA CON RESPECTO A LOS OTROS CANCERES?

Objetivo: Comparar la respuesta ovárica en pacientes con cáncer de mama con otros tipos de cánceres que criopreservaron ovocitos previo a la quimioterapia. Materiales y Métodos: Se incluyeron pacientes que realizaron congelamiento de óvulos por motivos oncológicos en la Institución, desde 11/2016 hasta 12/2017 inclusive. Todas tuvieron autorización del oncólogo previo al tratamiento. La decisión de comenzar la estimulación en cualquier momento del ciclo, se basó en la urgencia con la que se debía arrancar el tratamiento oncológico. Las dosis de medicación, se basaron especialmente en edad, conteo de folículos antrales (AFC) e índice de masa corporal (BMI). Las gonadotrofinas usadas fueron recombinantes o urinarias, dependiendo de la cobertura médica y del programa proteger. En los cánceres de mama se agregó letrozole 5mg/día desde el primer día de la estimulación hasta el día de la aspiración y luego de la misma, se continuó durante 7 días. Los protocolos de estimulación usados fueron el Estándar, donde se agregaron antagonistas de GnrH desde día 6 del ciclo en casos de normorespuesta o con folículos de 14 mm en los casos de baja respuesta. La descarga se realizó en la mayoría de los casos con triptorelina 210 mcg y en algunos casos con gonadotrofina coriónica humana urinaria (hCG) 10000UI. La aspiración folicular se realizó aproximadamente a las 36 horas de la descarga, guiada por ecografía transvaginal. En los Random Start se usó la estimulación según Cakmak y col. La descarga fue similar que en los estándar. Resultados: La patología que se diagnosticó con más frecuencia fue Cáncer de mama 61.2% (41/67) seguida por linfoma 23.8% (16/67). El 25% restante fueron cáncer de colon, cérvix, leucemia, tumores cerebrales y patologías autoinmunes (solo 2 casos).El grupo I (Cáncer de mama) vs el grupo II( linfomas y otros Canceres) Del total de las pacientes 14 tuvieron baja respuesta a la estimulación (menos o igual de 4 óvulos totales) 9 fueron Ca de mama y 5 fueron otros tipos de cánceres. Ver Resultados en Tabla 1. Conclusión: Si bien el número de óvulos totales y los MII fueron menores en las pacientes con cáncer de mama y la baja respuesta fue más frecuente en este tipo de pacientes, las diferencias no fueron estadísticamente significativas. Tampoco hubo diferencias en el resto de las variables, a pesar de que la edad si fue significativamente mayor en las pacientes con Ca de mama. El uso de letrozole disminuye el pico de estradiol con respecto al no uso, lo cual es beneficioso para las pacientes con tumores hormonodependientes como mama. Debido a la baja casuística y al diseño restrospectivo, consideramos que son necesarios más estudios con mejor diseño para poder sacar conclusiones. ¡QUIERO AYUDAR!

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RESULTADOS REPRODUCTIVOS EN TRANSFERENCIA EMBRIONARIA EN DIA 4 VS DIA 5

Introducción: In vivo el embrión se traslada desde la trompa hacia la cavidad uterina en estadio de mórula (día 4 del desarrollo embrionario). En éste estadio el embrión activa su genoma adoptando características propias que le permiten al biólogo una mejor selección embrionaria. Objetivo: Evaluar la eficacia de la transferencia en día 4 (D4) vs día 5 (D5), disminuyendo el tiempo de cultivo ex vivo y permitiendo evitar transferir en días feriados. Material y métodos: Estudio retrospectivo, observacional. Sobre un total de 1627 ciclos realizados entre enero y diciembre 2015 se incluyeron 892 pacientes con transferencias en fresco de uno o dos embriones. Se excluyeron los ciclos en los que se realizó PGD, transferencias de embriones criopreservados y ovodonación. Del total de ciclos evaluados (1403) sólo se tomaron en cuenta aquellas pacientes que realizaron transferencia embrionaria de embriones de D4 y D5; se dividieron las pacientes en 3 grupos según edad: Grupo 1: < 38 años (n 60), Grupo 2: 38 a 40 años (n 17) y Grupo 3: > 40 (n 10). Posteriormente en cada uno de los grupos se evaluaron tasa de embarazo (Hormona gonadotrofina humana positiva – HCG+), aborto y recién nacido. En el laboratorio se les practicó ICSI y permanecieron en cultivo embrionario a 37ª C, 6% CO2, 5% de O2 y 89% nitrógeno en una atmósfera humidificada. El estudio estadístico fue realizado con prueba de chi cuadrado (p 0.05). Resultados: Conclusión: En este grupo poblacional los resultados del empleo de transferencia en D4 y D5 fueron equivalentes en cuanto a los porcentajes de embarazos logrados, lográndose incluso buenos resultados al momento de evaluar tasa de aborto y recién nacidos vivos. De esta manera podemos concluir que las transferencias de D4 no aportan resultados negativos a la hora de decidir si transferir en D4 o D5. ¡QUIERO AYUDAR!

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La respuesta ovárica en pacientes oncológicas no se ve impactada por su patología

OBJETIVO: Comparar la respuesta de la estimulación ovárica en pacientes oncológicas previo a realizar QMT (quimioterapia) versus pacientes no oncológicas DISEÑO: Estudio retrospectivo y observacional. MATERIALES Y MÉTODOS: Se evaluaron 25 pacientes, que, vitrificaron óvulos para preservar fertilidad, previo a tratamiento oncológico desde 2006 hasta 01/2018. El grupo control incluyó 58 pacientes que realizaron ICSI por azoospermia con biopsia de testículo. Ambos grupos realizaron estimulación, comenzando a inicio de ciclo (día 1-2 o 3) con Hormona Folículo Estimulante recombinante (FSHr) y/o FSH mas Hormona Luteinizante urinarias (FSH+LH u). En los casos de Ca (cáncer) de mama se agregó letrozole 5mg/día. El antagonista se agregó con folículo de 14 mm y para la descarga se usó análogo de la Gnrh (Hormona liberadora de gonadotrofinas) o Gonadotrofina coriónica humana (hCG) 36 horas previo a la aspiración folicular. RESULTADOS: La patología por la cual las pacientes preservaron fertilidad fue, Ca de mama 14 (56%), Linfoma 6 (24%), Ca de colon 1(5%), Ca de cervix 1(5%) ,Leucemia 1(5%), Borderline de ovario1(5%), tumor cerebral 1 (5%). Ver resultados en tablas 1 y 2. DISEÑO: Estudio retrospectivo y observacional. MATERIALES Y MÉTODOS: Se evaluaron 25 pacientes, que, vitrificaron óvulos para preservar fertilidad, previo a tratamiento oncológico desde 2006 hasta 01/2018. El grupo control incluyó 58 pacientes que realizaron ICSI por azoospermia con biopsia de testículo. Ambos grupos realizaron estimulación, comenzando a inicio de ciclo (día 1-2 o 3) con Hormona Folículo Estimulante recombinante (FSHr) y/o FSH mas Hormona Luteinizante urinarias (FSH+LH u). En los casos de Ca (cáncer) de mama se agregó letrozole 5mg/día. El antagonista se agregó con folículo de 14 mm y para la descarga se usó análogo de la Gnrh (Hormona liberadora de gonadotrofinas) o Gonadotrofina coriónica humana (hCG) 36 horas previo a la aspiración folicular. RESULTADOS:La patología por la cual las pacientes preservaron fertilidad fue, Ca de mama 14 (56%), Linfoma 6 (24%), Ca de colon 1(5%), Ca de cervix 1(5%) ,Leucemia 1(5%), Borderline de ovario1(5%), tumor cerebral 1 (5%). Ver resultados en tablas 1 y 2. ¡QUIERO AYUDAR!

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FACTORES PRONÓSTICO DE EMBARAZO EN INSEMINACIÓN INTRAUTERINA: ANÁLISIS DE 783 CICLOS.

Objetivo: Identificar los factores pronóstico de embarazo en inseminación intrauterina (IIU). Diseño: Estudio descriptivo retrospectivo. Materiales y métodos: Se analizaron 783 ciclos de Inseminación Intrauterina realizados en Halitus Instituto Médico (HIM) entre enero 2015 y diciembre 2016. Los datos fueron obtenidos de la revisión de historias clínicas de los pacientes. Se usó Chi-Square para el análisis estadístico. Se calculó porcentaje de embarazo (definido como beta positiva, >25mUI/ml) según edad de la mujer, esquema de estimulación, número de folículos mayores a 16mm (dominantes) el día de la HCG, y tipo de semen (homólogo vs heterólogo) . Resultados: La tasa de embarazo (TE) por ciclo fue del 8,2% (64). Teniendo en cuenta el origen del semen, el 8,3% fueron embarazos con semen homólogo (50/550) y 7,9% (14/164) con semen heterólogo, sin encontrarse relación estadísticamente significativa. Esto probablemente esté en relación a las características del semen para indicar una IIU (al menos dos espermogramas con al menos 5 millones de espermatozoides móviles en el swim up o mini gradiente de densidad). De las betas positivas, el 50% (32) fueron con 1-2 folículos dominantes y el otro 50% (32) con 3-4. No encontramos relación entre la cantidad de folículos mayores a 16mm el día de la HCG y la TE. La mayor frecuencia de betas positivas se vieron en CN y con FSH recombinante pero estos resultados deben tomarse con precaución debido al escaso número de casos. De los 64 embarazos, 76% (49) resultaron en nacidos vivos, 17% (11) abortos espontáneos del 1er trimestre y del 4.6% (3) embarazo gemelar. Se reportó un solo embarazo ectópico. Con respecto a los 11 abortos hallados, 9 pertenecieron a mujeres menores a 35 años y solo 3 a mayores de 35 años. Por otro lado, sí se vió que de los 2 de los 3 embarazos múltiples, había 2-4 folículos dominantes y solo en una había 1 folículo mayor a 16mm el día de la HCG. Conclusión: La edad de la paciente sería un factor primordial para lograr el embarazo (declinación estadísticamente significativa en relación a la edad), datos acordes a la literatura mundial. El tipo de estimulación también influiría en la tasa de embarazo pero no ocurriría lo mismo con el número de folículos dominantes al día de la HCG. La chance de embarazo múltiple sí aumentaría con el número de folículos dominantes el día de la HCG. Llamativamente los abortos sucedieron en pacientes jóvenes, menores a 35 años ¡QUIERO AYUDAR!

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Pacientes con baja reserva ovárica: ¿Qué protocolo de estimulación es el más aconsejable para ellas?

Objetivo: Evaluarla efectividad de bajas dosis de gonadotrofinas con citrato de clomifeno y comparar con el ciclo convencionalen bajas respondedoras. Diseño: Estudio retrospectivo, año 2016. Se excluyeron pacientes oncológicas y quevitrificaron ovocitos. Materiales y Métodos: 346pacientes bajas respondedoras según consenso de Bologna, a las cuales se les aspiró ≤5 ovocitos. El análisis se dividió en tres grupos etarios: 26 a 34 años, 35 a 39 años y más de 40 años. El protocolo intermedio combinócitrato de clomifeno50 mg,2 comprimidos/día del3er al 7mo día del ciclo, FSHr300UI días alternos comenzando el 3er día yanta gonistas de GnRH,con folículo>14 mm. Los resultados se compararon con el protocolo convencional, (FSHr según edad, HMG-HP yantagonistas de GnRH). Descarga con HCG10000 UI,con folículo ≥ 18mm para ambos ciclos. Análisis estadístico :análisis de proporciones con Chi Cuadrado Pearson confianza del 95%. Variables analizadas: BetaβHCG positiva(valor superior a 15mUI/ml), tasa de aborto (interrupción del embarazo antes de las 12 semanas de gestación), embarazo bioquímico, embarazo clínico (definido como nacido vivo) y ectópico. Resultados: En las pacientes de 26 a 34 años no se observaron diferencias significativas en la tasa de Beta positiva, mientras que Las tasas de βHCG positivas fueron mayores en el rango etario de 35 a 39 años (51,85%, p=0,0124)sihubo diferencias en las pacientes de 35 a 39 años y mientras que en el grupo de más de 40 años se observó una mayor tasa de βHCG negativa (59,9%, p

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LA ECLOSION ASISTIDA CON LASER MEJORA LA TASA DE EMBARAZO EN CICLOS CON EMBRIONES CRIOPRESERVADOS

OBJETIVO: comparar el efecto de la eclosión asistida empleando pulsos de láser vs ácido tyrodes en ciclos con embriones criopreservados. DISEÑO: estudio retrospectivo, descriptivo. MATERIALES Y METODOS: el estudio incluyó 189 ciclos de transferencia de embriones descongelados en el período comprendido entre Enero de 2016 y Diciembre 2017; procedentes de ciclos de ICSI con ovocitos propios y que fueron criopreservados en día 5to de desarrollo. De acuerdo a la técnica de eclosión asistida efectuada se diferenciaron 2 grupos. El Grupo 1 comprendiendo los ciclos con embriones con eclosión asistida utilizando un agente químico como el ácido tyrodes y el Grupo 2 empleando pulsos de láser. Se evaluó para cada grupo la tasa de embarazo. Los resultados se analizaron con el programa Graph Pad InStat, mediante el test exacto de Fisher. RESULTADOS: de los 189 ciclos de transferencia embrionaria analizados, 100 fueron llevados a cabo con embriones criopreservados y con eclosión asistida mediante el uso de ácido tyrodes; mientras que 89 fueron mediante el uso de láser. No hubo diferencias significativas entre los grupos respecto a edad de las pacientes (36.0 ± 6.5 vs 36.6 ± 6.4), número de intentos previos (2.8 ± 1.5 vs 2.6 ± 1.3) ni embriones transferidos (1.6 ± 0.5 vs 1.5 ± 0.5). La tasa de embarazo por transferencia embrionaria fue significativamente mayor en el Grupo 2 que en el Grupo 1 (52.8 vs 43.0 %, respectivamente; p 0.0367). Los resultados clínicos para los grupos se resumen en la Tabla 1 CONCLUSIONES: la aplicación clínica de la eclosión asistida se ha propuesto como estrategia para incrementar las tasas de embarazo después de la descriopreservación de embriones. Diversos estudios han evaluado los efectos del láser en embriones humanos y en modelos animales, sin provocar efectos adversos, lo que representa una técnica segura. En los últimos años se ha incrementado, en las unidades de reproducción asistida, la utilización del láser para la eclosión asistida, en lugar de métodos físicos o químicos, ya que permite gran precisión en la ablación de la zona pelúcida, sin necesidad de provocar algún contacto físico o mecánico. Las técnicas químicas para adelgazar o abrir artificialmente la zona pelúcida generarían mínimos efectos adversos en los embriones; mientras que la principal ventaja del láser es que disminuiría esos efectos sin dañar las células permitiendo realizar orificios de manera rápida, eficiente, precisa y libre de sustancias químicas. En el presente estudio, encontramos que la tasa de embarazo resultó mayor en el grupo de embriones eclosionados con láser, denotando una posible reducción de la viabilidad de los embriones eclosionados con ácido Tyrodes. Por lo tanto, recomendamos la eclosión asistida con láser, aunque se requieren más estudios prospectivos para confirmar sus ventajas. ¡QUIERO AYUDAR!

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RESULTADO DE TRATAMIENTOS DE FERTILIZACIÓN ASISTIDA CON OVODONACIÓN

Introducción: La Ovodonación (OD) es, por ahora, la única alternativa cuando la paciente que desea un embarazo no cuenta con ovocitos propios. Analizamos los resultados de nuestro programa de OD durante los últimos 5 años Materiales y Métodos: El presente estudio se basa en un análisis observacional y retrospectivo de nuestra base de tratamientos de FIV/ICSI de los años 2008 a 2012 inclusive, en pacientes con 3 o menos Ooc Metafase II, determinando resultados en ciclos con las características mencionadas. Resultados: En 605 ciclos de donantes se aspiraron 14.016 ovocitos, de los cuales 10.068 eran MII. (75,7%). Conclusión: La OD es una alternativa posible para lograr una Tasa de Embarazo de 49,4% y una Tasa de Nacido Vivo de 28,8%*, en las pacientes que no pueden utilizar óvulos propios por distintas causas. ¡QUIERO AYUDAR!

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DETECCIÓN DEL GEN SUPRESOR TUMORAL PTEN PARA LA OPTIMIZACIÓN DEL DIAGNÓSTICO DEL CÁNCER DE ENDOMETRIO

Objetivos: 1. Optimizar, mediante el desarrollo de una nueva herramienta tecnológica, el diagnóstico precoz de las hiperplasias de endometrio precursoras directas del carcinoma endometrial (CE). 2. Desarrollar un anticuerpo sintético o aptámero de ADN dirigido contra el extremo amino terminal de la proteina PTEN, dado que los carcinomas y las hiperplasias endometriales han mostrado una disminución de la expresión de dicha proteína en el 97 y 100 % de los casos evaluados. 3. Validar el análisis de la expresión de PTEN como herramienta diagnóstica y pronóstica para las lesiones pretumorales y cancerosas endometriales. Materiales: Se seleccionaron muestras de tejido endometrial provenientes de 10 histerectomías con diagnóstico de CE. La presencia de CE, hiperplasias complejas típicas (HCT) y atípicas (HCA) y endometrio normal (EN) en cada espécimen fueron identificadas mediante los criterios establecidos internacionalmente. Métodos: Diseño del aptámero de ADN. Realización de inmunohistoquímicas con el aptámero y con el anticuerpo policlonal contra PTEN comercialmente disponible en CE, HCT, HA y EN. Ensayos de Western blots. Adquisición y análisis de imágenes mediante microscopía confocal. Resultados: Fue desarrollado un anticuerpo sintético o aptámero de ADN dirigido contra el extremo amino terminal de la proteína PTEN. La utilidad del aptámero fue analizada mediante técnicas “inmunohistoquímicas” en muestras de tejidos correspondientes a EN, HCT,HCA y CE. Los resultados fueron comparados con anticuerpos monoclonales considerados como “gold standard” y los resultados fueron aún superiores. El reactivo desarrollado permitió la identificación de lesiones con potencialidad de evolución a carcinoma endometrial, que no habían podido ser identificadas como tales mediante la evaluación histológica habitual. Conclusiones: El aptámero de ADN desarrollado permitió detectar y cuantificar la alteración de la expresión de la proteína PTEN en la totalidad de las HCT, HCA y CE. La disminución de la expresión o función de PTEN es un marcador precoz de las lesiones endometriales precancerosas. Esto nos permite proponer la utilización del oligoanticuerpo contra PTEN para la identificación temprana de hiperplasias susceptibles a la transformación neoplásica. Los cambios de expresión de la proteína PTEN, son elementos de valor diagnóstico y pronóstico para patologías como: cáncer de mama, cáncer de tiroides, cáncer de próstata, cáncer de colon, gliomas y endometriosis. ¡QUIERO AYUDAR!

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